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几个注意要点让巴氏染色液的染色更加顺利!

日期:2019-09-20浏览:2792次

        巴氏染色液在细胞染色上应用广泛,因为细胞中的细胞核是由酸性物质组成,它与碱性染料的亲和力较强;而细胞浆则相反,它含有碱性物质和酸性染料的亲和力较大。巴氏染色液利用这一特性对细胞进行多色性染色,细胞经染色后能清晰地显示细胞的结构,胞质透亮鲜丽,各种颗粒分明,细胞核染色质非常清楚,从而较容易发现异常细胞。通过巴氏染色可反映出细胞在炎症刺激下和癌变后的形态学变化,对早期发现和诊断一些病变和肿瘤具有较重要意义。
  巴氏染色液染色的注意事项:
  1、细胞核着色不佳
  (1)细胞核着色过浅:
  1)盐酸分化时间过长或苏木素染液时间过长。需要缩短分化时间或延长碱化时间;每日加入少量新鲜苏木素染液或重新配制苏木素液。
  2)在固定之前制片干燥。所以对巴氏染色的制片需要严格遵守湿固定的原则。
  3)自来水的PH值偏酸性。使用碱性溶液。
  (2)细胞核着色过深:
  1)盐酸溶液浓度不够。适当加入几滴盐酸以增加浓度。
  2)制片用高于95%以上浓度的酒精固定后可以出现染色过深。应用95%酒精固定。
  2、细胞浆着色不佳
  (1)如果全片内胞浆都淡染,则需要延长染色时间或更换新液。
  (2)如果胞浆不分色,均为浅红色。制片在固定前干燥或制片被有大量球菌样细菌影响胞浆染色。此情况可以适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况。
  (3)胞浆染成灰色或紫色,是由于苏木素染色时间过长或盐酸分化不佳。经过褪色后重新苏木素可以纠正。
  (4)由于标本的不同,同样配方的EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红,对不同的标本应该使用不同的EA染液。一般认为,EA36和EA50用于妇科标本,而EA65或改良EA用于非妇科标本。
  (5)胞浆不分色的另一重要原因是由于EA染液的PH值不恰当所致。如染色为红色,可以加少许磷钨酸溶液纠正;如染色均为蓝色或绿色,可以加少许饱和碳酸锂溶液纠正。对于改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳;染液使用更持久。

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