真菌荧光染色技术是近几年发展起来的革命性技术,以其高特异性、高效率、高灵敏度等成为真菌形态学检测的重要手段。这项技术可用于各种真菌检测,如体癣、股癣、手足癣、甲癣、头癣、花斑癣、霉菌性阴道炎、霉菌性肺炎、霉菌性肠炎、鹅口疮等,还可用于检测部分寄生虫。
真菌荧光染色的检验原理:
荧光素能与真菌细胞壁的β-多糖物质相结合,如纤维素、几丁质等,但不能与组织细胞结合。荧光素在紫外线激发光下使各种丝状真菌及酵母菌呈现荧光,包括念珠菌属、毛藓菌属、表皮藓菌属、小孢子菌属、组织胞浆菌属及曲霉属等。染液中氢氧化钾能溶解样品组织中的角质、消除杂质,促溶剂的加入使得样品组织中的角质溶解的更加迅速,组织更加透明,提高了检测灵敏度。选取的背景复染液能降低样品组织的背景亮度,使荧光信号更加清晰。
真菌荧光染色的样本要求:
1.皮屑、甲屑、毛发标本:先以75%酒精消毒病变部位,以钝手术刀刮取皮屑或甲屑适量;以镊子拔取病发数根,置玻片上。
2.组织液涂片或者病理切片按常规病理染色前固定、脱水、脱蜡等步骤进行准备。
真菌荧光染色的检验方法:
1.将标本置洁净玻片上;
2.滴加染液,让染液覆盖整个标本;
3.盖上盖玻片,等待1分钟;
4.吸去多余染液,在荧光显微镜下观察玻片。