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如何使用巴氏染色液

日期:2018-03-07浏览:1003次

  巴氏染色液使用场所应通风,并远离火源,涂片厚薄适宜,固定后方可染色;制片用高于95%以上浓度的乙醇固定后会出现染色过深,应用95%乙醇固定。苏木精染液上有一层金属膜,下有结晶沉淀,使用前应用滤纸过滤;苏木精染液在染够2000~3000张玻片后应更换新的染液;苏木精的染色时间随气温和染液情况而改。染液以覆盖涂片为宜,过少因蒸发导致染料沉淀.
 
  盐酸酒精分化的作用为分化掉胞浆上沾上的苏木素,因此时间不宜长,但如果分化不够,会造成细胞核颜色过深或(及)胞浆很难上色;分化后立即用自来水冲洗,不宜久置,否则可使全部颜色消失。返蓝亦称碱化,返蓝时间偏短则着色不充分,影响染色效果,碳酸锂每缸过500张玻片更新。
 
  操作巴氏染色液技术人员要流畅,动作干净利落,不可把上一缸染色液带入下一缸,每缸交替时要甩干玻片上残存液体。细胞浆着色不佳应考虑的因素,如果全片内胞浆都淡染,则需延长染色时间或更换新液。如果胞浆不分色或均为浅红色,适当增加染色时间能够部分纠正不分色状况。胞浆染成灰色或紫色是由于苏木素染色时间过长或盐酸酒精分化不佳,经过褪色后重新苏木素染色可以纠正。由于标本的不同,同样配方的EA染液可造成偏蓝、偏绿和偏红,对不同的标本应使用不同的EA染液,一般认为:EA36和EA50较适用于妇科标本,而EA65或改良EA较适用于非妇科标本。
  
  巴氏染色液详细介绍,将涂片置于95%乙醇中固定15 分钟以上,依次浸入80%、50%乙醇中各30 秒,水洗1~2分钟,甩干,浸入苏木精染液中3~5分钟,水洗1~2分钟,甩干,浸入盐酸酒精分化液中分化数秒,水洗1~2分钟,甩干。浸入返蓝液中数秒,水洗1~2 分钟,甩干。置于95%乙醇中漂洗,水洗甩干。浸入橘黄G染液中染1~3分钟;95%乙醇、95%乙醇、无水乙醇中漂洗各1次,时间各10~20秒。浸入EA36染液(或EA50染液)中染色2~5分钟,95%乙醇、95%乙醇、无水乙醇中漂洗各1次,时间各10~20秒。浸入浸蜡脱蜡透明液中2分钟。中性树胶封固,镜检。

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