巴氏染色液/注意事项/染色过程

  巴氏染色液细胞核着色过浅，盐酸分化时间过长或苏木素染液时间过长。需要缩短分化时间或延长碱化时间；每日加入少量新鲜苏木素染液或重新配制苏木素液。在固定之前制片干燥。所以对巴氏染色的制片需要严格遵守湿固定的原则。自来水的PH值偏酸性。使用碱性溶液。细胞核着色过深。盐酸溶液浓度不够。适当加入几滴盐酸以增加浓度。制片用高于95%以上浓度的酒精固定后可以出现染色过深。应用95%酒精固定。

透明过程:

  巴氏染色液染色的zui后一步是透明，使细胞的色度与细胞的重叠不致影响镜下检查。这是在脱水与制片封固之间的一项重要步骤。zui常用的透明溶剂使二甲苯，二甲苯的折射率在1.494，载玻片的折射率在1.515，两者较为匹配。如果二甲苯溶液出现颜色或变得浑浊，一定要更换新液。 　巴氏染色操作流程 95%乙醇固定（15min）→清水冲洗多次→苏木素染液（3-5min）→清水冲洗三次→蓝化→95%乙醇漂洗→橙黄染液（1-10s）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→100%乙醇漂洗→EA50（3-5m）→95%乙醇漂洗→95%乙醇漂洗→无水乙醇漂洗→无水乙醇（2min）→二甲苯（2min）→中性树胶封片。

胞浆染色:

  巴氏染色液胞浆染色在巴氏方法中亦称为OG—EA染色，它包括橘黄G（OG）和EA两部分染色。由于橘黄G是一种小分子染料，能够很快地作用于胞浆，一般染色时间不宜过长，通常1-2min。对于宫颈、阴道上皮中非正常角化细胞和角化型鳞癌细胞的胞浆中都可以出现鲜艳的橘黄色.封固制片,封固制片对于避免空气干燥的影响，制片经长期存放不褪色是非常重要的.一般使用24mm×50mm或24mm×60mm的盖玻片，用二甲苯调配的中性树胶进行封固.