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化学发光试剂的配置

日期:2016-09-22浏览:834次

  详细介绍核心知识.化学发光试剂的配置 在使用前等量混合A液和B液,混合后尽快使用。将膜片置混合液中于室温下振荡温育2分钟,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆盖全膜片。蛋白信号显现
.用平头镊钳住膜片,垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。置膜片于二层保鲜膜之间,小心赶尽气泡。将膜片吸附蛋白面朝上,置于X光片盒中。于暗室中压上X光片。根据信号的强弱适当调整曝光时间,一般为1min或5min,也可选择不同时间多次压片,以达*效果。显影冲洗。调节曝光时间,再次曝光显影。
    化学发光试剂本试剂是非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用X光片可快速地获得*的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。
  化学发光试剂原理:辣根过氧化酶使试剂中的发光物(Luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经SDS-PAGE分离,并转移到固相膜上(如NC、PVDF)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。当加入免疫印迹化学发光试剂后,Luminol发生氧化降解,并发射波长为428nm的光,此光可经X光胶片(放射自显影片)感光记录下来。更多相关知识,可以与本公司.

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