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化学发光试剂使用方法

日期:2016-06-17浏览:1114次

化学发光试剂使用方法:  
1.印迹膜制备按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作,适当的封闭非常重要。可以通过标记一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交联物。仔细地淋洗对于降低背景非常重要,在与HRP交联物温育后,膜片更需仔细洗涤,所有步骤均在室温下完成。  
2.化学发光试剂的配置在使用前等量混合A液和B液,混合后尽快使用。将膜片置混合液中于室温下振荡温育2分钟,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2ml以覆盖全膜片。  
3.蛋白信号显现  
1).用平头镊钳住膜片,垂直置于吸水纸以吸去过量试剂。  
2).置膜片于二层保鲜膜之间,小心赶尽气泡。  
3).将膜片吸附蛋白面朝上,置于X光片盒中。  
4).于暗室中压上X光片。  
5).根据信号的强弱适当调整曝光时间,一般为1min或5min,也可选择不同时间多次压片,以达*效果。显影冲洗。  
6).调节曝光时间,再次曝光显影。

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