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使用过敏源试剂前怎么可以不了解这些!

日期:2022-08-12浏览:88次

  过敏源试剂采用亲和素-生物素化过敏原抗原预包被板ELISA原理,检测人血清/血浆中存在的针对特异性过敏原IgE抗体,配以酶标记抗人IgE单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。
 
  过敏源试剂主要组成成分:
 
  检测板:包被有过敏原和生物素标记的牛血清白蛋白(阳性质控,位于每条试剂条的较上端)的硝酸纤维素膜,置于塑料反应槽中;
 
  洗脱液:(TRIS/NaCl,包含NaN3),可稀释的清洗液;标记有生物素的抗人IgE抗体(多抗),含NaN3;酶标链霉亲和素,连接有碱性磷酸酯酶的链霉亲和素(含C4H5NOS和C4H6BrNO4);底物,BCIP/NBT(5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸盐/氯化硝基四氮唑蓝)。
 
  过敏源试剂的试验操作:
 
  试剂盒中的所有成分必须是同一批。过期时请勿使用。使用前须平衡至18~30C.
 
  1.去掉尾端的白色封头和顶端的红盖,让反应管内的缓冲液排出。用纱布擦试细头。
 
  2.将注射器接在反应管的顶端,将标本由细头抽到注射器接头
 
  3.将反应管平放,在室温下(18-30C)反应100分钟。
 
  4.将标本从反应管排出,抽出注射器的推杆,由注射器针简向反应管内注入1毫升(4项組合产品为0.8m)清洗液,将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦试细头。
 
  5.将绿色的结合液由细头抽到注射器的接头处。
 
  6.将反应管平放,在室温下(18~30C)反应100分钟或16小时。
 
  7.将结合液由反应管排出,抽出注射器的推杆。加五濉清洗液到注射器针简中,让它流下。再在注射器针简内注入1毫升(4项组合产晶为0.8m1)清洗液,让它流过反应管。将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦试细头。
 
  8.在塑料烧杯中注入少量(约2毫升,4项組合产品为1.5ml)清洗液。通过反应管将清洗液抽到注射器中。抽出注射器的推杆,让清洗液流出。9.在注射器针简内注入1毫升(4项组合产F品为0.8m)清洗液,让它自然流下。重复一次。将注射器的推杆插入并推到底,用纱布擦试细头。
 
  10.将黄色的底物/指示剂通过反应管抽到注射器中。
 
  11.平放反应管,强阳性标本在5分钟内可观察由黄到紫的颜色变化,弱阳性标本在90分钟内观察颜色变化。

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